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Métabolisme et contrôle génétique

 

Activité respiratoire des levures et mutations

 
OBJECTIFS

Objectifs notionnels :

Les activités fondamentales des cellules telles que le métabolisme (…) sont sous le contrôle d’un programme génétique

Objectifs méthodologiques :

Concevoir un protocole ; utiliser l’outil informatique ; réaliser techniquement en suivant un protocole ; saisir les résultats par lecture de graphes ; adopter une démarche explicative.

MANIPULATIONS
Principe :

Comparer l’activité respiratoire d’une souche de levures présentant des mitochondries normales à celle d’une souche mutée caractérisée par l’absence de crêtes mitochondriales.

Matériel indispensable :
  • Interface Nortek et logiciel Winbio.
  • Sonde oxymétrique Jeulin, adaptateur pour interface Nortek.
  • Agitateur magnétique et barreau aimanté, petit cristallisoir.
  • Pillulier de 15 mL ou cytoréacteur Pierron.
  • Solution tampon phosphate pH 6.2 à 10 g.L-1 de glucose, oxygénée à l’aide d’un aérateur d’aquarium.
  • Souches rho+ et rho- de levures sur gélose, en boîtes de Pétri.
  • Bécher de 100 mL, éprouvette graduée et petit entonnoir plastique.
  • Etaleur pour boïte de Pétri.
  • Aérateur d’aquarium terminé par un tube effilé.

Réalisation technique :

Voir la fiche technique sur le serveur SVT de l’Académie de Lille :

http://www4.ac-lille.fr/~svt/svt
(A faire levures rho+ et rho-).

TRUCS, ASTUCES, DIFFICULTES POSSIBLES

Les souches de levures peuvent être fournies par SORDALAB, de même que les milieux de culture pour la préparation des boîtes élèves par repiquage : voir le contenu du kit Sordalab «métabolisme des levures».